细胞信号转导开题报告:细胞信号转导ppt
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检测胞内信号蛋白表达量的方法是怎样?
流式细胞检测胞内蛋白的主要步骤包括细胞固定、细胞膜通透处理、封闭非特异性结合位点以及染色。细胞固定:这是流式细胞检测胞内蛋白的第一步,目的是保持细胞的形态和结构,防止在后续处理过程中发生变化。固定剂通常使用甲醛、乙醇等,能够迅速且有效地固定细胞。
首先你确定拿到了这两种细胞系,通过PCR反应证明一个是野生型一个是突变型,即snp。然后用试剂盒提取RNA,设计引物,采用半定量或绝对定量的方法,测定mRNA表达水平;然后另取细胞裂解,提取总蛋白,用特异性抗体检测蛋白表达量。
根据实验样本来源选择合适的内参抗体,如哺乳动物组织或细胞样本常选用β-actin、β-tubulin等。考虑目的蛋白的分子量大小和内参蛋白的分子量差异,通常应保证相差5 kDa以上。根据目的蛋白的表达部位选择合适的内参抗体,如胞内蛋白检测可选β-actin等,核蛋白检测可选Lamin A、Lamin B等。
中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所的科研概况...
1、中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所是一个实力雄厚的研究机构,拥有超过800名科研人员致力于科学研究,其中科技人员数量约为350人,研究生和博士后队伍规模达到440人左右。
2、中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所成立于2000年5月,由原中国科学院上海生物化学研究所(1950-2000年)与原中国科学院上海细胞生物学研究所(1950-2000年)整合而成。
3、细胞所,全称中国科学院细胞生物学研究所。前身是1950年成立的中国科学院实验生物学研究所(实生所)。从1950年到2000年,细胞所发表科学论文近1600篇,培养博士生107人 2000年,细胞所与生化所整合成立中国科学院生物化学与细胞生物学研究所(生化与细胞所)。
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